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小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的使用要小心加謹慎
更新時間:2023-02-03 點擊量:
973
小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基
的關鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲細胞系的生長。昆蟲細胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補加FBS,血清提供了細胞生長過程中所需的營養(yǎng)物質和微量元素,使細胞能健康生長和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點:價格高;每批血清的質量不同,影響細胞的生長和病毒復制;血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難;血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養(yǎng)基變得很復雜。因此,無論工業(yè)上或學術上,開發(fā)無血清培養(yǎng)基都是必然的趨勢。
由于在無血清培養(yǎng)基中含有從血清或動物臟器中純化的蛋白成分,如胰島素、轉鐵蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分離純化的難度和成本。細胞在無血清低蛋白或無蛋白培養(yǎng)基環(huán)境中對剪切應力更為敏感,故需適當提高保護劑的濃度。無血清培養(yǎng)基的應用有時會降低重組蛋白的產量,在無血清培養(yǎng)基內,較高的細胞生長密度與相對較低水平的重組蛋白產量這一事實表明,促進細胞分裂的因子與促進重組蛋白生產的桿狀病毒感染晚期起作用的因子是不盡相同的。
小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基
旨在用于大規(guī)模擴增草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)細胞系,也常用于通過桿狀病毒表達系統(tǒng)(BEVS)進行蛋白表達。 IPL-41培養(yǎng)基是對原始IPL配方的改良,用于大規(guī)模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎培養(yǎng)基中加入了胎牛血清和TPB培養(yǎng)基(Tryptose Phosphate Broth),成功地實現(xiàn)了IPL-21 AE (III)細胞系的大規(guī)模連續(xù)培養(yǎng)。該培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)和維護鱗翅類衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒。IPL-41培養(yǎng)基基礎也以用于無血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。
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